Solentim VIPS

Solentim VIPS™ (verified in-situ plate seeding) — система для документированного рассева суспензии клеток, обеспечивающая рассев единичных клеток в 96-луночные планшеты и документирование процесса. Прибор требуется для получения моноклональных клеточных линий в соответствии с требованиями регуляторов (FDA и аналогичных структур).

VIPS выполняет рассев единичных клеток, мягко дозируя суспензию клеток каплями нанолитрового объема, в процессе дозирования производится съемка результата, его анализ. В случае, если в лунку попадает одна клетка, прибор немедленно наполняет лунку средой. Если в лунку попадает более одной клетки, эта лунка элиминируется из дальнейшей работы. Если лунка остается пустой, попытки повторяются до получения положительного результата. После проведения рассева система сканирует всю планшету, получая при этом изображения всей лунки целиком в соответствии с требованиями регулятора для доказательства моноклональности линии.

Преимущества данного метода:

1. Высокая эффективность посева — за счет оптимизации и в зависимости от типа клеток может быть достигнута эффективность посева до 85 %
2. Высокий уровень выживаемости клеток обеспечивается благодаря низкому давлению в проводящих путях прибора, например, по сравнению с проточной цитофлуориметрией
3. Высокая надежность полученных результатов — за счет визуализации клеток непосредственно в лунках, в отличие от принтеров, которые обеспечивают визуализацию клеток «по пути» в лунку
4. Дополнительное подтверждение моноклональности линии за счет визуализации серии срезов по оси Z в каплях нанолитрового объема на дне сухой лунки (до добавления среды)
5. Данные с изображением лунки в капле можно включать в отчет о подтверждении клональности линии продуцента при предоставлении досье на препарат
6. Исключительная быстрота и простота использования прибора — рассев и документация 96-луночного планшета занимает приблизительно 10 минут (в отличие от принтеров единичных клеток, которые требуют последующую дополнительную визуализацию клеток в полученной планшете)
7. Устранение проблем краевого эффекта, поскольку клетка в капле всегда находится в центральной части лунки.

Дополнительные возможности прибора

• Ежедневный скрининг планшеты с документированием изображения всей лунки целиком (в качестве альтернативы этот процесс можно проводить с помощью Cell Metric)
• Возможность валидации системы с использованием флуоресцентных красителей (красный и зеленый каналы).

Преимущества системы

• Устраняется необходимость использования двух отдельных приборов (принтера единичных клеток и биоимиджера, дающего изображения лунок целиком)
• Регулятором допускается проведение одного раунда клонирования
• Высокая эффективность посева требует меньшего количества планшет в проекте
• Многоразовый резервуар для клеток совместим с разными типами клеток, протоколы санитизации предоставляются
• Автоматическая идентификация и подтверждение наличия отдельных клеток в лунках на момент посева ускоряет процесс, поскольку дальнейший мониторинг можно проводить только в лунках, где в нулевой день была одна клетка
• Совместимость данных с системой Cell Metric, при ее наличии, для ежедневной визуализации процесса деления и роста клеток
• В отличие от FACS или новых оптофлюидных систем работа на приборе VIPS не требует сложного обучения, и работать на ней сможет любой сотрудник лаборатории после короткого инструктажа
• Дизайн эксперимента обеспечивает высокую достоверность данных клонирования
• Рассев клеток при низком давлении и отсутствие необходимости центрифугирования позволяет успешно работать с клетками, требующими особо бережного обращения
• Показана редкая частота получения паразитных изображений в лунках / ложноотрицательных результатов (всего 0,06 %, по данным Janssen)
• Возможность дополнительного контроля качества процесса с использованием флуоресценции при валидации
• Дополнение принятого в качестве отраслевого стандарта отчета о клональности позволяет привязать результаты визуализации на всем протяжении роста колонии в лунке к данным о результатах посева в нулевой день.